1、制備1:10樣品勻液
稱取25g樣品置盛有225mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水水的無菌均質(zhì)杯內(nèi)8000 r/min-10000r/min均質(zhì)1min-2min.或放入盛有225mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中。用拍擊式均質(zhì)器拍打1min-2min。制成1:10的樣品勻液。
2、制備1:100樣品勻液
用1mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10樣品勻液1mL沿管壁慢慢注入盛有9mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭不要觸及稀釋液面) ，振搖試管或換用支無菌吸管反復(fù)吹打使其混合均勻。制成1:100的樣品勻液。
3、制備10倍品勻液
按上一步操作程序。制備10倍系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1次，換用1次1mL無菌吸管或吸頭。
4、取樣并制備平板
選擇2個(gè)-3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液) ，在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí)，吸取1mL樣品勻液于無菌平皿內(nèi)，每個(gè)釋釋度做兩個(gè)平皿。同時(shí)，分別吸取1mL空白稀釋液加入兩個(gè)無菌平皿內(nèi)空白對照。
及時(shí)將15mL-20mL冷卻至46℃的平板計(jì)數(shù)瓊脂培養(yǎng)基(可放置于46℃士1℃恒溫水浴鍋中保溫)傾注平皿，并轉(zhuǎn)動平皿使其混合均勻。
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